在《熒光顯微鏡如何激發熒光的？》一文中我們曾經介紹了熒光顯微鏡的熒光激發原理，今天小編說說熒光顯微鏡激發光波長。

熒光顯微鏡是利用一個高發光效率的點光源，經過濾色系統發出一定波長的光(如紫外光3650入或紫藍光4200入)作為激發光、激發標本內的熒光物質發射出各種不同顏色的熒光后，再通過物鏡和目鏡的放大進行觀察。

這樣在強烈的對襯背景下，即使熒光很微弱也易辨認，敏感性高，主要用于細胞結構和功能以及化學成分等的研究。熒光顯微鏡的基本構造是由普通光學顯微鏡加上一些附件(如熒光光源、激發濾片、雙色束分離器和阻斷濾片等)的基礎上組成的。

熒光光源——般采用超高壓汞燈(50一200W)，它可發出各種波長的光，但每種熒光物質都有一個產生最強熒光的激發光波長，所以需加用激發濾片（一般有紫外、紫色、藍色和綠色激發濾片），僅使一定波長的激發光透過照射到標本上，而將其他光都吸收掉。每種物質被激發光照射后，在極短時間內發射出較照射波長更長的可見熒光。熒光具有專一性，一般都比激發光弱，為能觀察到專一的熒光，在物鏡后面需加阻斷(或壓制)濾光片。它的作用有二：一是吸收和阻擋激發光進入目鏡、以免于擾熒光和損傷眼睛，二是選擇并讓特異的熒光透過，表現出專一的熒光色彩。兩種濾光片必須選擇配合使用。

常見問題：

1.熒光顯微鏡的汞燈發出的是廣譜激發波長，是不是已經涵蓋了所有波長不需要再調了？

沒有覆蓋所有波長、有全光譜光源，通常使用的是100W 50W的汞燈為光源。

2.熒光高壓汞燈使用壽命大概多久？

超高壓汞燈(HBO)發光時,泡內產生50～70個標準大氣壓,它的引燃電壓很高,工作時維持電壓較低,約為50V～60V,電絲電流在4A左右,燈的壽命與啟動次數和工作時間有關。啟動次數愈多,每次工作時間愈短,壽命愈短。德國萊茨公司規定每啟動一次工作3h,共啟動70次為準,平均壽命為200h；日本奧林巴斯公司平均壽命是400h。使用中,當燈泡變黑或達規定時間應調換燈泡 ,否則除了燈的光度下降外,而且還有可能出現爆炸事故。熄滅時一般約15分鐘方完全冷卻,在未完全冷卻時,切勿打開燈室,因熱燈泡內壓力很大,聚冷會引發爆炸。因此需要嚴謹使用，部分實驗室會要求統計使用時間 ，填寫記錄以保證安全。